Phòng nuôi: Điều hòa nhiệt độ, các kệ giàn có nắp bóng điện huyền quang.
Một số thiết bị khác: Nồi hấp, máy cất nước, tủ lạnh (bảo quản hóa chất), cân kỹ thuật (độ chính xác là 0,01g), pH kế, máy say, bộ dao kéo để cấy, đèn cồn…
2. Chuẩn bị nguyên liệu
DD MS, nước dừa, đường, thạch Agar, BAP, than hoạt tính, chuối xanh…
Máy chuẩn PH, nồi hấp, nước cất, bình thủy tinh (nút cao su hoặc nút bông)...
II. Kỹ thuật nhân nhanh giống lan Thạch hộc tía bằng phương pháp nuôi cây mô tế bào
Môi trường (1lít) sử dụng để nhân nhanh chồi lan Thạch hộc tía có các thành phần như sau:
MS + 150ml/l Nước dừa + 20g/l Sucarose + 8g/l Agar + 1ml/l BAP + 150g/l chuối + 0,5g/l than hoạt tính.
1. Làm môi trường (1lít)
Bước 1: Lấy dd MS , 1ml BAP, 150ml nước dừa, 20g đường, 8g thạch Agar, 0,5g than hoạt tính, 150g chuối (đã gọt vỏ) cho vào máy say sinh tố say nhuyễn. (Lưu ý: Cho tất cả các thành phần trên vào ống đong, đổ nước cất cho đến khi đủ 1 lít môi trường)
Bước 2: Cho môi trường vào nồi đun nóng, quấy đều tay tới khi thạch agar tan hết, môi trường trong nồi sôi đều.
Bước 3: Đo pH dd môi trường ở nhiệt độ 50o - 600, sao cho pH đạt từ 5,5 - 5,8.
Bước 4: Đổ môi trường vào bình mẫu (dày khoảng 1,5 – 2cm), đậy nút chặt (có thể dùng nút cao su hoặc nút bông).
2. Hấp môi trường
Xếp các bình môi trường vào nồi hấp, chỉnh thời gian hấp từ 25 đến 30 phút. Nồi hấp tạo áp suất hơi nước bão hòa là 103,4 kPa tương đương với 121o C. Ở 121o C hầu hết các vi sinh vật ở trong môi trường đều bị tiêu diệt, ngay cả các dạng bào tử. Khi nồi hấp về áp suất 0 chúng ta tiến hành lấy bình chứa môi trường ra khỏi nồi hấp và chuyển vào phòng cấy.
3. Nhân nhanh Thạch hộc tía
- Bước 1: Bật đèn tím (UVA, UVB) để sử lý vô trùng, tia tử ngoại có tác hại với mắt và da nên trước khi cấy cần bật đèn từ 15 đến 20 phút, tắt đi khoảng 15 đến 20 phút mới được vào cấy.)
- Bước 2: Dùng cồn 700 lau dụng cụ cấy đã được hấp vô trùng (dao, kẹp, panh…. ); bề mặt nơi chuẩn bị cấy, bề mặt bên trong và ngoài tủ cấy; lau bình mẫu, bình chứa môi trường trước khi chuyển vào box.
- Bước 3: Tách các chồi Protocom từ bình mẫu chuyển sang các bình chứa môi trường nhân nhanh (mỗi bình cấy 6 – 8 chồi).
4. Nuôi chồi
Phòng nuôi để nhiệt độ từ 220 – 250 , số giờ chiếu sáng từ 9 – 10h/ ngày và cường độ ánh sáng là từ 1800 – 1900lux. Nuôi chồi từ 75 đến 90 ngày có thể tiến hành nhân nhanh đợt tiếp theo. Do lan Thạch hộc tía nuôi cấy trong môi trường vô trùng nên ít bệnh. Thường hay bị bệnh mốc: hay gặp hai loại là mốc trắng (có xuất hiện mốc trắng trên bề mặt môi trường), mốc đen (có xuất hiện mốc đen trên bề mặt môi trường). Ngoài ra có thể gặp hiện tượng bị nhiễm khuẩn (bình mẫu có xuất hiện màu hồng nhạt trên bề môi trường).
5. Một số bệnh thường gặp trong quá trình nhân nhanh lan Thạch hộc tía
Do lan Thạch hộc tía nuôi cấy trong môi trường vô trùng nên ít bệnh. Thường hay bị bệnh mốc: hay gặp hai loại là mốc trắng (có xuất hiện mốc trắng trên bề mặt môi trường), mốc đen (có xuất hiện mốc đen trên bề mặt môi trường). Ngoài ra có thể gặp hiện tượng bị nhiễm khuẩn (bình mẫu có xuất hiện màu hồng nhạt trên bề môi trường).
Nguồn: skhcn.bacninh.gov.vn
Mọi tư vấn chi tiết thiết bị xin liên hệ!
CÔNG TY CP KHOA HỌC KỸ THUẬT HUẤN LUYỆN VÀ KIỂM ĐỊNH VIỆT
Văn phòng GD: Đường DX17, Ấp Phú Thọ, Xã Phú Chánh, TX. Tân Uyên, Tỉnh Bình Dương
Văn phòng tại Tp.HCM: K60, KDC Thới An, Đường Lê Thị Riêng, Quận 12, TP. Hồ Chí Minh
Email: viet@vietsci.com
Số điện thoại: (0274) 3868738 - (0274) 3899738
Hotline: 0917.211.441 - 0978.78.76.13